摘 要：以水溶液对酱腌菜进行预处理，超声后过滤，并用HPLC法测定处理后的样品溶液中对羟基苯甲酸酯类的含量。方法加标回收率为95.4%-102.3%，6次测定的RSD（n=6）小于3.98%。方法操作方便，分析速度快，结果准确。 
关键词：高效液相色谱，对羟基苯甲酸酯，酱腌菜。 
对羟基苯甲酸酯类具体检验项目有对羟基苯甲酸甲酯、乙酯、丙酯。国家卫生标准明文对这类添加剂进行限量 [1]。目前，食品中对羟基苯甲酸酯类的检验方法是气相色谱法[2]。其方法是将样品酸化后用具毒性的溶剂乙醚进行多次萃取，浓缩近干后再用毒性更大的甲醇定容，然后用气相色谱仪测定。这种方法费时费力，对羟基苯甲酸酯类物质的损耗也较大。本文采用水溶液直接对样品进行溶解稀释，超声后过滤，然后用HPLC进行测定[3]，取得了满意的结果。 
一、实验部分 
1、样品与试剂。（1）酱腌菜：市售。（2）试剂：甲醇（专用试剂）；乙酸胺（优级纯）。（3）标准物质：对羟基苯甲酸甲酯、乙酯、丙酯（国家标准物质研究中心）各1.0g。实验用水为蒸馏水。 
2、仪器及分析条件。（1）1100型液相色谱仪（配紫外检测器，美国Agilent公司）。（2）仪器工作条件：色谱柱为迪马C18（200mm×4.5μm）；流动相为甲醇和0.02mol/L乙酸胺混合溶液（V甲醇：V乙酸胺=55：45）；流速为1.0ml/min；柱温为30℃；波长为286nm；定量环为20μl。（3）CQ-250型超声仪（上海船舶电子研究所）。 
3、标准溶液的配制。取购置的标准物质对羟基苯甲酸甲酯、乙酯、丙酯配制并按逐级稀释的方法配制成标准溶液系列，如表1所示。 表1 标准溶液系列 （μg/mL） 
标准物质 STD-1 STD-2 STD-3 STD-4 STD-5 STD-6 
对羟基苯甲酸甲酯 100.0 50.0 25.0 10.0 5.0 0 
对羟基苯甲酸乙酯 100.0 50.0 25.0 10.0 5.0 0 
对羟基苯甲酸丙酯 100.0 50.0 25.0 10.0 5.0 0 
4、样品预处理 
准确称取约20.0000g样品于300mL烧杯中，加入适量水，搅拌均匀经超声仪超声30min，用蒸馏水定容于250mL容量瓶中，静置后上清液经普通滤纸过滤后再用0.45μm微孔滤膜过滤，收集滤液于样品瓶中待测；同时作试剂空白。
二、实验结果及讨论 
1、工作曲线。按选定的仪器条件对已配制的标准溶液对羟基苯甲酸甲酯、乙酯、丙酯进行测量，以组分的色谱峰面积为纵坐标，组分的质量浓度为横坐标，绘制校准曲线，校准曲线的回归方程及相关系数如表2所示。 表2 工作曲线及相关系数 
标准物质 工作曲线 相关系数 
对羟基苯甲酸甲酯 y = 0.0254x + 0.0176 0.9995 
对羟基苯甲酸乙酯 y = 0.0413x + 0.0276 0.9993 
对羟基苯甲酸丙酯 y = 0.0152x + 0.0099 0.9996 
2、分析结果与精密度试验。按照选定的仪器条件分别测定标准溶液、空白溶液和试样溶液。计算每g样品中被测物质的含量，结果如表3所示。 
表3 分析结果与精密度试验（n=6） 
物质 对羟基苯甲酸甲酯 对羟基苯甲酸乙酯 对羟基苯甲酸丙酯 
含量/（μg•g-1） 50.25 52.05 48.41 
RSD/ % 2.58 3.19 3.98 
检出限/（μg•mL-1） 0.48 0.50 0.65 
3、精密度试验：对样品进行6次分析测定，计算相对标准偏差，结果如表3所示。 
4、标准加入回收试验。在预处理之前，将一定量的标准溶液加入到样品中，按选定的方法预处理并进行预处理，测定样品中的对羟基苯甲酸酯类含量，作回收试验，计算回收率，结果如表4所示。 
表4 标准加入回收试验结果 
元素 加入量/(μg/mL) 原测定值/(μg/mL) 加标后测定值/(μg/mL) 回收率(%) 
对羟基苯甲酸甲酯 10.00 50.25 60.08 99.7 
对羟基苯甲酸乙酯 15.00 52.05 64.95 95.4 
对羟基苯甲酸丙酯 20.00 48.41 70.29 102.3 
3、结论 
以水溶液对酱腌菜进行预处理，并采用HPLC法测定处理后的样品溶液中的对羟基苯甲酸酯类物质含量，方法操作简单，结果准确，方法可用于质量检测部门食品中对羟基苯甲酸酯类物质的检测。 
参考文献 
[1] 中华人民共和国国家标准. 食品添加剂使用卫生标准[S]，GB2760-1996. 
[2] 中华人民共和国国家标准. 食品中对羟基苯甲酸酯类的测定[S]. GB/T5009.31-2003. 
[3] 杨祖英，马永健，常凤启编.食品检验[M].北京：化学工业出版社，2001.31-33. 
[4] 王晓凤，刘鸿皋，王树松，等. 光谱分析中空白与检出限的讨论[J]. 光谱实验室，1998，15（2）：76-78.